Респираторные болезней свиней. Методы оценки эффективности вакцинации

Респираторные болезней свиней. Методы оценки эффективности вакцинации
Сергей Кукушкин
Опубликовано в №10 (162) октябрь

Специфическая профилактика инфекционных болезней — стратегическая задача ветеринарной службы в свиноводстве. Недавний мониторинг ситуации в России показал, что одни из наиболее распространенных возбудителей в свиноводческих хозяйствах этой страны — цирковирус свиней 2-го типа (ЦВС-2), Mycoplasma hyopneumoniae и возбудитель илеита Lawsonia intracellularis, к которым серопозитивны 100, 60 и 86,5 % хозяйств соответственно. Все три возбудителя эндемичны для всех стран с промышленным свиноводством. ЦВС-2 и M. hyopneumoniae — первичные респираторные патогены, которые вместе с вирусом РРСС являются основными возбудителями комплекса респираторных болезней свиней (КРБС).

Вакцинация — основное средство контроля и профилактики этих заболеваний во всем мире. Уровень вакцинации национального поголовья против ЦВС-2 в 2009 году в США составил более 95 %, в Канаде и Мексике — более 80 %, в Великобритании и Южной Корее — более 70 %, в Японии и Германии — более 65 %. Вакцинация поросят против энзоотической пневмонии (M. hyopneumoniae) давно стала рутинной мерой в странах с индустриальным свиноводством. Кроме того, широко практикуется вакцинация против болезни Ауески, актинобациллезной плевропневмонии (АПП) и болезни Глессера, возбудители которых также являются составными частями КРБС.

 

Общие вопросы

Довольно часто у практикующих ветеринарных врачей возникают вопросы: «Как правильно интерпретировать результаты лабораторных исследований на РРСС, ЦВС-2, M. hyopneumoniae, АПП, болезнь Глессера, Ауески?», «По каким параметрам лучше оценивать эффективность вакцин против респираторных болезней свиней?». Учитывая большую актуальность и практическую значимость этих вопросов, в данной статье мы рассматриваем основные методы оценки эффективности вакцинации против респираторных болезней свиней в практических условиях.

 

Лабораторные исследования

Самый распространенный метод лабораторных исследований — серологические исследования. В целом исследование сывороток крови на наличие антител позволяет:

  • выяснить статус стада (есть/нет циркуляция возбудителя);
  • определить уровень серопревалентности в группе/стаде (не для всех болезней);
  • установить длительность колострального иммунитета;
  • определить динамику заболевания в стаде (не для всех болезней);
  • провести дифференциацию переболевших и вакцинированных или неинфицированных животных (болезнь Ауески — антитела к белкам gB и gE, АПП — антитела к токсину ApхIV, болезнь Глессера — антитела к белку OppA и др.).

Для выявления болезни Глессера (гемофилезный полисерозит) сейчас доступны исследования как на общие антитела (например, в наборе ИФА Biovet, Канада), так и на антитела к белку OppA (набор ИФА BioChek, Нидерланды), которые образуются только в организме переболевших свиней (отсутствуют у здоровых носителей возбудителя). В OppA-тесте могут позитивно реагировать также привитые животные. Для исследований стада на наличие циркуляции возбудителя АПП любого серотипа целесообразнее всего использовать наборы, выявляющие антитела к токсину ApxIV, которые образуются только в организме свиней, контактировавших с полевым возбудителем АПП (любого серотипа). После вакцинации против АПП любой вакциной антитела к токсину ApxIV не образуются, поскольку он не входит в состав вакцин.

С учетом того, что хронические формы АПП, болезни Глессера и стрептококкоза имеют очень сходные поражения, использование вышеописанных тестов — хороший диагностический инструмент.

Таким образом, информативность/ценность результатов зависит от выбора диагностического набора, квалификации лаборатории, выявляемых антител (IgG, IgM, белки, токсины и др.), схемы пробоотбора и других факторов.

 

Цирковирусная инфекция свиней

Много дискуссий вызывает вопрос значимости серологических исследований для оценки эффективности вакцин/вакцинации против ЦВС-2. Он напрямую взаимосвязан со следующими ключевыми вопросами.

  1. Все ли стада серопозитивны?
  2. Образуются ли антитела после переболевания?
  3. Образуются ли антитела после вакцинации?
  4. Можно ли серологически отличить привитых и переболевших животных?
  5. Можно ли оценить уровень клеточного иммунитета к ЦВС-2 путем исследований сывороток крови на антитела?
  6. Есть ли зависимость между уровнем антител к ЦВС-2 и защитой от заболевания?

Общеизвестно, что во всем мире все коммерческие стада (хозяйства), включая SPF, позитивны по ЦВС-2. То есть во всех хозяйствах у свиней есть носительство этого вируса. Основываясь на данных литературы и собственных исследованиях, на первые три вопроса можно однозначно ответить «да». К сожалению, на вторые три вопроса ответ будет «нет».

Для серологической диагностики ЦВС-2 в России сейчас доступны несколько коммерческих наборов ИФА, а также исследования ФГБУ «ВНИИЗЖ» («домашняя ИФА», т. е. реакция ставится с использованием коммерческих и собственных реагентов, включая антиген).

Коммерческие тест-системы ИФА:

  1. набор компании Synbiotics (США);
  2. набор компании BioChek (Нидерланды);
  3. набор компании Ingenasa (Испания);
  4. набор компании «Нарвак» (РФ).

Одни из главных характеристик, определяющих конечный результат исследований, — чувствительность и специфичность теста.

Наибольшей чувствительностью, т. е. способностью определять потенциально/истинно позитивные пробы, обладают наборы ИФА компаний Synbiotics и BioChek.

Набор компании Ingenasa — Ingezim Circovirus IgG/IgM — обладает меньшей чувствительностью. Однако он ценен тем, что это единственный набор, позволяющий дифференцировать ранние антитела IgM (образуются большей частью после контакта с живым вирусом) от антител IgG (образуются спустя две-три недели после контакта с полевым или вакцинным антигеном). Этот набор позволяет определить статус цирковирусной инфекции в стаде: «активная инфекция», «заболевание было недавно», «животные переболели давно или не имели активной инфекции».

При разработке серологического теста ИФА, используемого для исследования полевых сывороток крови в ФГБУ «ВНИИЗЖ», эталоном являлся коммерческий набор ИФА Ingezim Circovirus IgG/IgM (Ingenasa, Испания). По официальным данным разработчиков, чувствительность российского теста относительно коммерческого набора ИФА Ingezim составила 67 %. Однако эта система не позволяет отдельно исследовать IgM и IgG, как оригинальный тест.

В табл. 1 представлены два реальных примера значимости серологических исследований на ЦВС-2.

Таблица 1. Результаты исследования сывороток крови свиней из хозяйств, не вакцинирующих от ЦВС-2

Положительных проб/исследовано проб всего.

В данных исследованиях важным диагностическим показателем стало наличие иммуноглобулинов класса M (IgM), которые появляются в первые дни после инфицирования полевым возбудителем. Врачи вышеуказанных хозяйств, опираясь на клиническую картину, результаты патологоанатомического вскрытия и неполных лабораторных исследований (обнаружение Haemophilus parasuis и Pasteurella multocida в пробах патматериала от больных животных), даже не подозревали о наличии цирковирусной инфекции и первичной роли ЦВС-2 в наблюдаемых симптомокомплексах.

Нами также были проведены сравнительные серологические исследования сывороток крови привитых против ЦВС-2 свиней из десяти российских хозяйств в двух коммерческих тестах (табл. 2).

Таблица 2. Результаты исследований в ИФА сывороток крови свиней групп доращивания и откорма, привитых против ЦВС-2

Положительных проб/исследовано проб всего.

Как видно из табл. 2, все вакцины стимулируют выработку гуморальных антител (IgG). Уровень серопревалентности (количество позитивных проб) больше зависит от характеристик выбранного теста, чем от вакцины. Вакцины, изготовленные на основе масляных адъювантов, как правило, дают более высокие титры антител. Это также справедливо в отношении двухдозовых вакцин. Важный диагностический показатель — наличие иммуноглобулинов IgM, которые могут показывать наличие активной или субклинической инфекции среди вакцинированных животных.

В то же время необходимо помнить, что серологические исследования на ЦВС-2 не являются ведущим критерием оценки эффективности вакцин/вакцинации против этого заболевания.

Серологические исследования на ЦВС-2 актуальны для оценки динамики заболевания в стаде (показывают время инфицирования/контакта животных с полевым вирусом). Все вышеуказанные тест-системы пригодны для такого исследования, но нужно учесть, что уровень сероконверсии (количество позитивных проб), уровень антител и время их выявления будут сильно различаться в зависимости от использованного диагностического набора.

Многочисленными исследованиями в Северной Америке и Европе установлено, что уровень антител к ЦВС-2 не коррелирует с защитой от заболевания. Уровень гуморальных антител (IgG) в крови индивидуален для каждого животного и не является достоверным показателем его защиты или заболевания ЦВС-2. Антитела свидетельствуют лишь о контакте иммунной системы животного с антигеном ЦВС-2 любого происхождения, но не информируют о последствиях.

В табл. 3–5 представлены результаты независимого канадского исследования, направленного на изучение связи серологического ответа и времени вакцинации с уровнем защиты поросят от ЦВС-2. В данном исследовании поросят в возрасте 19–59 дней прививали вакциной Ингельвак ЦиркоФЛЕКС. До опыта в хозяйстве клинические признаки цирковирусной инфекции обычно начинали проявляться в возрасте около 85 дней.

Таблица 3. Средний уровень антител (IgG) к ЦВС-2 в ИФА у контрольных и вакцинированных поросят, привитых в возрасте 26, 40 и 52 дней

* Положительная сыворотка при значении s/p ≥ 0,3.

** Один день после вакцинации.

Таблица 4. Средний геометрический титр антител к ЦВС-2 в НРИФ у контрольных и вакцинированных поросят, привитых в возрасте 26, 40 и 52 дней

* СГТА — средний геометрический титр антител; НРИФ — непрямая реакция иммунофлюоресценции.

** Один день после вакцинации.

Таблица 5. Смертность среди контрольных и вакцинированных поросят на откорме

По результатам данного исследования можно сделать два основных вывода.

Первый: не обнаружено корреляции между уровнем антител после вакцинации и последующей защитой поросят от ЦВИС. Независимо от того, что сероконверсия после вакцинации была слабой или совсем отсутствовала, все группы вакцинированных поросят были хорошо защищены от заболевания.

Самая младшая протестированная группа — это поросята, вакцинированные в 26-дневном возрасте. Несмотря на то что к 30-му дню после вакцинации ни у одного из протестированных поросят не наблюдалась сероконверсия, уровень защиты был достаточно высоким (уровень падежа в вакцинированной группе составлял 2,8 % против 10,6 % в контрольной группе).

Второй: поросят можно эффективно вакцинировать в присутствии материнских антител. Поросята, которым на момент вакцинации исполнилось от 19 до 22 дней, были самыми младшими среди вакцинированных и имели самый высокий уровень материнских антител. Несмотря на это, уровень падежа в данной группе оказался в 19 раз ниже, чем в непривитой контрольной (0,4 % против 7,6 %).

Последний вывод также был подтвержден исследованиями в Западной Европе, где не наблюдали никакой разницы между группами привитых поросят с высокими и низкими титрами колостральных антител (см. Табл. 6).

Таблица 6. Общий привес (кг) у вакцинированных поросят с высокими или низкими титрами материнских антител на момент вакцинации

Поросята вакцинированы Ингельвак ЦиркоФЛЕКС в возрасте 2–4 недель жизни.

При проведении данного исследования установлено, что титры антител >1:320 у поросят перед вакцинацией не оказывали отрицательного влияния на эффективность вакцины. Все вакцинированные животные, независимо от уровня материнских антител, имели значительно больший привес, чем контрольные непривитые животные. Это подтверждает результаты предыдущих работ, в которых было продемонстрировано отсутствие интерференции с материнскими антителами, когда поросят иммунизировали вакциной Ингельвак ЦиркоФЛЕКС в период отъема.

Поэтому можно утверждать, что вакцина эффективно преодолевает высокий уровень материнских антител начиная с возраста 2 недель и старше.

Сейчас во всем мире для оценки качества вакцин/вакцинации против ЦВС-2 ориентируются на следующие показатели:

  1. наличие/отсутствие виремии и ее уровень у привитых животных (исследование проб крови/сывороток крови в ПЦР в реальном времени на наличие вируса и его количества). Установлено, что уровень ЦВС-2 в крови, эквивалентный ≥5–6 lg копий ДНК/мл сыворотки, коррелирует с клиническими формами заболевания. В России количественная ПЦР (ПЦР в реальном времени) для исследования на ЦВС-2 разработана в ФГУ «ВНИИЗЖ», а также в ряде других научных учреждений. В последнее время в нашей стране стали доступны коммерческие ПЦР-наборы (например, LSI VetMAX Porcine Circovirus 2, Франция), которые могут использоваться в лабораториях с необходимым уровнем оборудования и квалификации персонала;
  2. сравнение производственных параметров у привитых и невакцинированных животных / до и после вакцинации / привитых разными вакцинами (заболеваемость, смертность, уровень выбраковки, среднесуточный привес, однородность животных, конверсия корма и др.).

Сравнение производственных показателей, безусловно, основной критерий полевой эффективности для вакцин против всех респираторных заболеваний.

 

Оценка легких убойных свиней, M. hyopneumoniae, АПП

Значительной информативностью для большинства респираторных заболеваний, особенно для энзоотической пневмонии и АПП, обладает оценка легких убойных свиней.

Безусловно, нужно помнить, что для постановки диагноза «энзоотическая пневмония» или «АПП» обязательны три составляющие:

  • клиническая картина заболевания (для M. hyo это сухой непродуктивный кашель, напоминающий лай);
  • положительные лабораторные исследования (серология, ПЦР или микробиология);
  • характерные поражения легких на убое (рис. 1).

В отношении серологических исследований следует учитывать, что Mycoplasma hyopneumoniae — слабый индуктор гуморальных антител (IgG), выявляемых в коммерческих наборах ИФА. Серологические методы пригодны лишь для определения статуса стада (позитивное/негативное) и вероятного возраста инфицирования животных полевым возбудителем. Серология M. hyo не имеет никакой корреляции с поствакцинальной защитой. Более того, большинство вакцинированных против энзоотической пневмонии свиней остаются серонегативными в традиционных ИФА-тестах или демонстрируют низкие титры гуморальных антител.

Рис. 1. Здоровые (слева) и пораженные Mycoplasma hyopneumoniae (справа) легкие свиньи

Все методики оценки легких построены на том принципе, что общая поверхность легких составляет 100 % и каждая из семи долей легкого свиньи занимает определенную часть в этом целом. При осмотре учитывают степень поражения каждой доли отдельно и фиксируют для дальнейших расчетов. Регулярная оценка легких убойных свиней позволяет отслеживать в динамике такие важные показатели, как:

  1. число легких с пневмонией по группе убоя;
  2. число легких с плевритами и абсцессами по группе убоя;
  3. средний процент поражения поверхности легких по группе убоя;
  4. средний процент поражения поверхности легких среди свиней с пневмонией;
  5. число легких со значимым уровнем поражений (≥5 % поверхности легких).

Такую оценку рекомендуется проводить как минимум три-четыре раза в год, оптимально — ежемесячно. Полученные данные позволяют реально оценить степень давления возбудителя на стадо и экономический ущерб от заболевания. После вакцинации это исследование наглядно показывает степень «прогресса в защите легких» (у вакцинированных свиней уровень поражений должен быть ниже, чем у непривитых). В табл. 7 представлен пример применения метода оценки легких по системе PigMon в крупном российском холдинге.

Таблица 7. Сравнение эффективности двух программ вакцинации поросят против ЦВС-2, M. hyo и АПП методом оценки легочных поражений

Кроме уровня поражения поверхности легких, важный диагностический критерий — число легких с плевритами и абсцессами. Но здесь нужно помнить, что этот показатель характеризует уровень давления не только возбудителя АПП, а всего респираторного комплекса. Плевриты и абсцессы могут быть обусловлены многими респираторными возбудителями (АПП, микоплазмы, болезнь Глессера, стрептококки и др.).

Таким образом, всесторонний анализ результатов оценки легких и производственных данных позволяет реально оценить эффективность применяемых схем вакцинации на уровне стада.


Болезнь Ауески

Важное значение в респираторном комплексе занимает вирус болезни Ауески. По сложившемуся стереотипу, многие специалисты относят этот возбудитель к группе болезней, проявляющихся в нервной форме. Однако нервные явления можно наблюдать в основном только у поросят-сосунов, полученных от серонегативных свиноматок. С учетом того, что во многих хозяйствах России отмечается хроническая циркуляция полевого возбудителя и большинство свиноматок серопозитивные, данная форма болезни встречается довольно редко. У поросят групп доращивания и откорма вирус болезни Ауески вызывает респираторные нарушения и является составной частью КРБС. В системе профилактики и контроля этого заболевания вакцинация — основное звено. В большинстве стран с развитым свиноводством реализуются национальные программы по искоренению болезни Ауески с использованием только маркированных вакцин, особенно на эндемичных территориях. Главное преимущество таких вакцин в том, что после их применения легко провести дифференциацию поствакцинальных антител от постинфекционных. В нашей стране доступны как маркированные вакцины, так и дискриминирующие тесты. К сожалению, практически все российские вакцины немаркированные (gE+).

Интерпретация результатов серологических исследований проводится так:

  • gB — общие антитела к вирусу болезни Ауески;
  • gE — антитела к полевому или вакцинному немаркированному вирусу;
  • gB+gE+: животные имеют антитела после контакта с полевым вирусом болезни Ауески и/или после вакцинации немаркированной вакциной (или колостральные антитела от таких матерей), если животные привиты маркированной вакциной и имели «приживление» полевого вируса, то все равно будут gB+gE+;
  • gB+gE–: животные имеют антитела к вакцинному маркированному вирусу (или колостральный иммунитет от вакцинированных матерей, привитых маркированной вакциной), животные не имели контакта с полевым вирусом;
  • gB–gE–: животные серонегативные по Ауески.

На рис. 2 представлен пример вакцинации маркированной вакциной в одном крупном российском холдинге.            

Рис. 2. Оценка эффективности маркированной вакцины против болезни Ауески с использованием дискриминирующей диагностики (gB, gE) в позитивном хозяйстве

В проведенном нами исследовании привитые и невакцинированные свинки содержались вместе в одном помещении (секторе). Ремонтных свинок прививали маркированной вакциной Ингельвак Ауески MLV в 90 и 120 дней жизни. Сыворотки крови исследовали в наборах ИФА IDEXX на наличие антител к белкам gB и gE. Как видно из результатов исследований, к 170-му дню жизни все непривитые животные были позитивны к полевому вирусу (gЕ+). Среди вакцинированных все были позитивны к Ауески (gB), но только 10 % животных имели антитела к полевому вирусу (gE), что свидетельствует о хорошей защите привитых животных от полевого возбудителя.

Таким образом, при использовании маркированных вакцин и дискриминирующих тестов ИФА у нас появляются реальные инструменты контроля ситуации и оценки эффективности вакцинации против болезни Ауески.

Заключение

Оценка эффективности вакцин/вакцинации против респираторных болезней свиней должна проводиться путем комплексного анализа производственных показателей, результатов лабораторных исследований и данных оценки легких убойных свиней с учетом характеристик применяемых препаратов и специфики заболеваний.

Другие материалы рубрики
Комфорт коровы и «большое молоко»: четыре фактора успеха
Александр Хрущев, Николай Разумовский
Опубликовано в №8 (184), август

Очевидно, что здоровая и счастливая корова будет давать больше молока, чем животное больное и несчастное. В связи с этим комфорт дойного стада — предмет постоянного внимания в хорошем хозяйстве. Но как этот комфорт...

Елена Слав
Опубликовано в №7(195), июль
Теги:

Ассоциация по выращиванию ремонтного молодняка молочного КРС (DCHA) в 2016 году выпустила обновленную версию Золотого стандарта по правильному выращиванию ремонтного молодняка. Этот базовый документ создан...

Ленинградские технологии «финского» молока
Алексей Жуков
Опубликовано в №6 (146), июнь

Ленинградская область еще при Советском Союзе подавала пример современного и грамотно организованного производства молока. Свою репутацию регион сохранил и в рыночные времена. Пять лет назад ЗАО «Агротехника» Тосненского...

Владимир Тимошенко, Андрей Музыка
Опубликовано в №4 (144), апрель

Если корове созданы комфортные условия содержания, то она может лежать по 12-14 часов в сутки. Животные, которые много лежат, более продуктивны, чем те, которые стоят. При этом корова примерно 20 раз в день встает на ноги, чтобы...

Модернизация фермы: эффективные альтернативы доильному залу
Алексей Семков
Опубликовано в №1 (129), январь

Главные цели реконструкции и модернизации МТФ — увеличение объемов производства молока, улучшение его качества и, как следствие, рост основных экономических показателей деятельности хозяйства — выручки, прибыли и...

«Эликсир здоровья» для быков-производителей
Михаил Карпеня, Иван Дубина
Опубликовано в №1 (141), январь

В молочном скотоводстве на совершенствование популяции отцовская сторона влияет гораздо больше, нежели материнская. Поэтому необходимо повышать воспроизводительные способности используемых при осеменении маточного поголовья...

Комментарии
Войти как